Elisa酶聯檢測
技術原理:
酶聯免疫吸附試驗(又稱酵素免疫分析法,Enzyme-linked immunosorbent assay,簡稱 ELISA)利用抗原抗體之間專一性鍵結之特性,對檢體進行檢測;由于結合于固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性,因此設計其鍵 結機制后,配合酵素呈色反應,即可顯示特定抗原或抗體是否存在,并可利用呈色之深淺進行定量分析。根據待測樣品與鍵結機制的不同,ELISA可設計出各種 不同類型的檢測方式,主要以三明治法(sandwich)、間接法(indirect)、以及競爭法(Competitive)三種為主,以下為各種方法 之介紹。
三明治法
三明治法常用于檢測大分子抗原,一般之操作步驟為:
三明治法分別以兩種抗體對檢體中的抗原進行兩次專一性辨認,因此專一性相當高,但此待測抗原必須是多價抗原,如此才可獲得兩種以上的專一性抗體,以分別進行夾心;而且此法需要足夠的表位空間以進行抗原抗體的夾心,所以并不適用于半抗原或小分子抗原等分子量較小之標的。
間接法
間接法常用于檢測抗體,一般之操作步驟為:
競爭法
競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制,一般用于檢測小分子抗原,其操作步驟為:
結果判斷
定性測定
定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出”有”或”無”的簡單回答,分別用”陽性”、”陰性”表示。” 陽性”表示該標本在該測定系統中有反應。”陰性”則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結果,即用滴度來表示反應的強度,其實質仍是一個定性試驗。在這 種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,呈陽性反應的最高稀釋度即為滴度。根據滴度的高低,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的 深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。
在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。
定量測定
ELSIA操作步驟復雜,影響反應因素較多,特別是固相載體的包被難達到各個體之間的一致,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考 標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質的夾心法ELISA,標準曲線的范圍一般較寬,曲線最高點的吸光度可接近2.0,繪制時常用半對數 紙,以檢測物的濃度為橫坐標,以吸光度為縱坐標,將各濃度的值逐點連接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平坦,中央較呈直線的部分是最理想的檢測 區域。
測定小分子量物質常用競爭法,其標準曲線中吸光度與受檢物質的濃度呈負相關。標準曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。ELISA測定的標準曲線注意圖中橫坐標為對數關系,這更有利于測定系統的表達。
服務內容
您需要提供以下材料:
細胞上清和血清等,試劑盒(可代購)。
您將獲得以下結果:
1.質量保證 | 2.發貨時間 | 3.關于售后 |
Transheep 有一套成熟的質檢程序,產品發貨前均經過質量檢測,確保您收到的產品質量無誤! | Transheep擁有大量的基因現貨產品,本公司的現貨產品從訂貨日期起一周以內即可到貨,大大縮短了您的等待時間!另外Transheep的一站式克隆平臺也能讓您體驗到前所未有的快速定制服務! | Transheep所售出的產品全部登記在冊,如果您拿到我們的產品覺得和實質不相符或存在問題,您只需要告訴我們相關產品信息我們會迅速做出反應,為您提供解決方案或退款! |
4.訂購流程 | 5.聯系我們 | 6.相關服務: |
聯系我們→客戶或銷售人員與您溝通→簽訂合同→支付預付款→執行項目→確認收貨→支付尾款→售后服務 | Transheep提供免費的技術咨詢,任何關于產品或者技術問題,都可以聯系我們們。 免費熱線:400-0179890 服務郵箱:[email protected] | 基因合成 亞克隆構建 3,UTR驗證實驗 啟動子合成及驗證 慢病毒包裝 腺病毒包裝 穩轉株構建 |